El cáncer de mama es el principal tipo de cáncer y la causa número uno de muerte por cáncer en las mujeres de México y del mundo. El cáncer de mama triple negativo (TNBC) es la forma más agresiva de la enfermedad y no existen tratamientos específicos para combatirla. Por esta razón, se emplea la quimioterapia o los inhibidores de punto de control inmunológico, aunque no son muy eficientes para el tratamiento del TNBC. En este contexto surge la necesidad de buscar terapias alternativas, como lo son las vacunas de células dendríticas (DCs), una inmunoterapia eficiente para el tratamiento del cáncer de próstata o con melanoma. El objetivo de este trabajo es optimizar el uso de agonistas de receptores tipo toll (TLRs) para inducir la maduración óptima de las DCs, y el uso de células dendríticas convencionales de tipo 1 (cDC1). Se caracterizó el fenotipo de las DCs diferenciadas con GM-CSF e IL-4 (GM-DCs), identificándolas como cDC2 y se indujo la diferenciación de cDC1 y cDC2 con FLT3L y DL1 (DL1-DCs). Se realizaron ensayos de activación con agonistas de los TLR3, TLR4, TLR7 y TLR9 para identificar la funcionalidad de los TLRs. A partir de estos resultados se buscó identificar la combinación de agonistas que indujera la expresión más alta de marcadores de activación y del ARNm de citocinas. Se evaluó la migración in vivo de ambas preparaciones de DCs estimuladas con el cóctel seleccionado y finalmente, se evaluó su eficiencia en el modelo murino de tumor ortotópico. Los resultados muestran que las GM-DCs no influyeron en el crecimiento del tumor, promovieron la esplenomegalia e indujeron una mayor infiltración de linfocitos T CD4+. Por su parte, las DL1-DCs indujeron una respuesta temprana. La mayoría de los linfocitos T CD8+ infiltrados en el tumor expresaron PD-1, lo que sugiere el agotamiento de estas células y que la combinación de la vacunación con cDC1 e inhibidores de punto de control inmunológico podría mejorar los resultados alcanzados.

Breast cancer is the leading cause of cancer and death due to cancer in women in Mexico and around the world. Triple-negative breast cancer (TNBC) is the most aggressive form of this disease, and there are no specific treatments available. This is why chemotherapy and immune checkpoint inhibitors (ICIs) are used in the clinic; however, despite ICIs' high effectiveness in other types of cancer, this benefit is not achieved by TNBC patients. Thus, it is needed to develop new strategies, such as dendritic cell (DCs) vaccines, that have been tested in patients with prostate cancer and melanoma with promising results. This research aimed to improve DC vaccination through an optimized DC maturation with Toll-like receptors (TLRs) agonists and conventional type 1 dendritic cells (cDC1). DCs differentiated with GM-CSF and IL-4 (GM-DCs) were phenotyped as cDC2, whereas cDC1 and cDC2 were differentiated with FLT3L and DL1 (DL1-DCs). TLR functionality was assessed through activation assays with TLR3, TLR4, TLR7, and TLR9 ligands. These results allowed the identification of the activation cocktail that induced the higher expression of activation markers and mRNA levels of cytokines, and in vivo migration was analyzed to confirm activation efficiency. Lastly, the efficiency of both GM-DCs and DL1-DCs cultures was analyzed in the 4T1 breast cancer model. The results show that GM-DCs did not affect tumor growth, induced splenomegaly, and favored CD4+ T cell infiltration, whereas DL1-DCs showed an early response that might have been dampened by the tumor microenvironment. Lastly, most tumor-infiltrating CD8+ T cells expressed PD-1, which might reflect T cell exhaustion and supports the combination of cDC1 vaccination and ICIs therapy.